对X2、分离X2、表征X6
5、真菌最陡爬坡实验
选择合适的色素步长，对X2、分离X2、表征X6，及培3个显著因素进行最陡爬坡实验，养基优化结果如表3所示，真菌随X2，色素X2，分离X6含量的表征增加，发酵液中色素吸光度值(Y)先升高后降低，及培在第3组达到最高，养基优化因此以第3组浓度作为响应面实验的真菌中心点。
6、色素响应面实验设计及结果
根据最陡爬坡实验结果，分离对X2，X2，X6进行响应面设计，各因素水平如表4所示，响应面试验设计及结果如表5所示。对实验结果进行数学方程拟合，得到色素吸光值(Y)与3个显著性因素的二次回归模型：
吸光值=1.0037+0.0204X2+0.0489X4+0.0442X6-0.1100X2X2-0.0925X4X4-0.1522X6X6-0.0132X2X4+0.0595X2X6+0.0640X4X6
有回归模型的方差分析(表6)可知：F=8.08、P=0.017(P＜0.05)表示回归模型显著，决定系数R2=0.9357(R2＞0.85)，失拟项P=0.052(P＞0.05)表示失拟项不显著、回归模型拟合度良好。由表7可知X2X2，X4X4的P值小于0.05，表明NaN03、MgS04·7H20的二次项对模型具有显著影响，X6X6的P值小于0.01，表明CS的二次项对模型具有极显著影响，而一次项和交互项的显著性较差，也验证了各因素与响应值之间不是线性关系。
利用Minitabl7得到该模型X2、X4、X6的极值分别为0.1313、0.3333、0.2323，结合最陡爬坡实验设计的原理得到X2、X4、X6的真实值分别为0.6803、0.0366、14.4646，实际操作中可取X2=0.68、X4=0.037、X6=14.5，故优化后的发酵培养基的配方为：NaNO3 0.68g/L，K2HPO4 0.48g/L，MgSO4·7H2O 0.037g/L，CaCl2·2H2O 0.036g/L，葡萄糖18g/L，CS14.5mL/L，TM1mL/L。经过重复性实验得到优化后培养基中色素吸光度值为1.004，是优化前0.612的1.64倍。
三、结论
（1）真菌DT06产生的黄色色素是一种新色素，为多羟基化合物。
（2）DT06色素有良好的抗氧化性和稳定性，具有潜在应用价值。
（3）培养基优化后DT06色素的产量是优化前的1.64倍。
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